ซูบารุ ฮาเซกาวะ มีความทะเยอทะยานที่จะเป็นหนึ่งในซุปเปอร์สตาร์บาสเก็ตบอลที่เก่งที่สุดตลอดกาล อย่างไรก็ตาม เรื่องนี้ดูเหมือนจะหยุดลงเมื่อทีมบาสเก็ตบอลของโรงเรียนเขาหยุดกิจกรรมเป็นเวลาหนึ่งปี เขาตกใจกับข่าวนี้ และตัดสินใจที่จะไม่เล่นบาสเก็ตบอลอีกต่อไป
วันหนึ่ง ป้าของเขา มิโฮชิ ทาคามูระ เชิญให้เขาเป็นโค้ชทีมบาสเก็ตบอลหญิงของสถาบันเคชินเกี่ยวกับวิธีการเล่นกีฬานี้ และเขาก็ตอบตกลงอย่างไม่เต็มใจ เขาได้พบกับนักเรียนชั้นประถมศึกษาปีที่ 6 โทโมกะ มินาโตะ, มาโฮะ มิซาวะ, ไอริ คาชิอิ, ฮินาตะ ฮากามาดะ และซากิ นางาซึกิ และเริ่มฝึกฝนพวกเขาในกีฬานี้โดยมีเป้าหมายเพียงหนึ่งเดียว นั่นคือเอาชนะคู่ต่อสู้ที่แข็งแกร่งทุกคนตลอดการแข่งขัน
โร-คิว-บู! ติดตามความพยายามของเด็กหญิงประถมศึกษา 5 คนและโค้ชของพวกเธอในการพัฒนาสไตล์การเล่นบาสเก็ตบอลแบบน่ารักของพวกเธอ